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B16-F10+luc小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記
更新時間:2024-08-01 點擊量:300

B16-F10+luc小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記

,B16-F10 luc

貨號:YJ-0062a(B16-F10種屬鑒定)

價格: 3200.0

規格: 1*10 6

細胞介紹

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

1 來源:小鼠黑色素瘤

2 形態:上皮細胞樣  貼壁生長

3 含量:>1x106 細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5 用途:僅供科研使用

細胞篩選

該細胞為穩定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養基正常培養。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。

一.培養基及培養凍存條件準備

1 準備DMEM(NaHCO3 1.5g / L,推薦 YJ-128-0001或者GIBCO,貨號12800017,添加NaHCO3 1.5g/L89 %,優質胎牛血清10 %P/S雙抗 1%

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

4)該細胞在DMEM(1.5g/LNaHCO3)培養基中生長良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO33.7g/L),若使用DMEM3.7g/L NaHCO3)培養基培養細胞時需要提高CO2濃度(7%-10%)。

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